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技術文章
更新時間：2023-05-22
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維C功能強大，但也不是越多越好。資料顯示：維C毒性很低，長期攝入1000 mg/天無不良反應。但當大量服用，攝入量超過3000 mg/天時，會出現腹瀉、胃腸紊亂、草酸和尿酸排泄量增加、腎結石的形成增多等不良反應。維生素C泡騰片中還加入了很多糖、鈉和香精等，這些成分的過多攝入也會給健康造成負擔。
如何測定維生素C泡騰片中維生素C及有關物質？K2025高效液相色譜儀給你答案。
實驗準備
原理
維生素C在260nm處有紫外吸收，使用高效液相色譜法進行測定。
色譜條件：
K2025高效液相色譜儀：K2025 P2二元高壓輸液泵、K2025 AS自動進樣器、K2025 CO柱溫箱、K2025 UVD紫外-可見光檢測器、Wookinglab色譜工作站；
色譜柱： NH2 4.6×250mm，5μm或者相當的色譜柱；
流動相：甲醇- 磷酸鹽緩沖溶液（取磷酸二氫鈉38.0g與磷酸氫二鈉5.04g，加水使溶解成1000mL，即得）；
柱溫：25℃；
進樣量：20μL；
流速：1.0mL/min；
波長：260nm。
測定步驟
色譜圖及結果
按照色譜條件進行采集，對樣品1和樣品2進行測試，供試品溶液色譜圖和對照溶液色譜圖如下：
樣品1的供試品及對照品色譜圖
圖1 供試品溶液色譜圖
表1 供試品溶液色譜圖積分結果
圖2 對照溶液色譜圖
表2 對照溶液色譜圖積分結果
樣品2的供試品及對照品色譜圖
圖3 供試品溶液色譜圖
表3 供試品溶液色譜圖積分結果
圖4 對照溶液色譜圖
表4 對照溶液色譜圖積分結果
空白溶液和對照溶液的疊加偏移色譜圖
圖5 空白溶液和對照溶液的疊加偏移色譜圖
計算
通過上述數據發現，樣品1的供試品溶液中的雜質峰面積為15.987，對照溶液的峰面積為186.369，不滿足雜質峰面積的和不大于對照溶液峰面積1%的要求；樣品2供試品溶液中的雜質峰面積為15.648，對照溶液的峰面積為269.720，不滿足雜質峰面積的和不大于對照溶液峰面積1%的要求。
結論與討論
結論
結果表明，使用Wooking K2025 高效液相色譜儀對維生素C泡騰片中維生素C及有關物質進行測定，維生素C的理論塔板數4835，滿足國家食品藥品監督管理局標準中規定的維生素C理論塔板數不低于1500的要求；雜質峰和目標峰的分離度為2.187，滿足2020年版《中國藥典》的要求。此方法可做為維生素C泡騰片中維生素C及有關物質測定的依據。
討論
01
維生素C泡騰片中維生素C及有關物質的測定選用的是氨基柱，同時對兩款色譜柱做了對比，其中一款氨基柱在進供試品溶液時沒有出現雜質峰和溶劑峰，對照溶液目標峰的拖尾因子為1.503，拖尾嚴重；而另外一款氨基柱NH2 4.6×250mm，5μm，分離度、理論塔板數等均滿足要求，所以色譜柱的選擇對該實驗起關鍵作用。
02
維生素C不穩定，很容易被氧化，所以實驗用樣品和試劑均需現用現配，且需要避光操作，同時容量瓶和進樣小瓶均需是棕色的。樣品前處理完成后需要盡快上機完成測試。
03
測試結果顯示維生素C泡騰片中雜質峰面積與相應的對照溶液中維生素C的峰面積的比值大于標準中規定的比值1%，所以在盡量避光縮短前處理的操作時間的前提下，是否可以考慮在溶劑中加入還原劑來減緩維生素C的氧化。
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